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PCR实验室改造常用指南

发布时间:2020-10-17 07:46:00        作者:山西东胜科星







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pcr实验室建立方法:

样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。

建立前PCR区。该去专门用于准备各种反应,这个区域必须保持干净,而且没有来自粘贴和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。





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PCR实验室平面布局(一级屏障)

设计根据实验场所提供的场地空间,设计微生物实验区,以建筑面积为23m2为例。应设有一个P2主实验室,一个一更缓冲间,一个二更缓冲间,一个洗刷消毒间。

设计充分利用现有的空间,根据国家相关规范和实验场所的特殊要求进行平面布置。考虑生物安全实验室应同时实施一级屏障和二级屏障的要求,其中一级屏障主要体现在微生物实验区的平面布置和维护结构方面,二级屏障主要体现在空调净化系统方面。在平面布置方面把人和物流分隔开,防止人和物的gan染:实验操作人员通过一更缓冲间和二更缓冲间进入P2主实验室;实验物体通过两个互锁式传递窗进出P2主实验室,其中一个互锁式传递窗设在主实验室和准备间之间,另外一个设在主实验室和洗刷消毒室之间,保证了洁净物不受gan染,同时保证了污染物尽快传进洗刷消毒室进行消毒灭菌。






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PCR实验室污染的预防与控制

PCR实验室设计的***问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。






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